Avanza el desarrollo de un kit argentino de diagnóstico rápido de la histoplasmosis diseminada progresiva

La histoplasmosis diseminada progresiva  (HDP) es una forma clínica de una enfermedad producida por el hongo Histoplasma capsulatum. El término diseminado progresivo refiere al crecimiento y multiplicación continua del hongo en otros órganos y sistemas, además del pulmón, que es el primer órgano afectado. Esta forma clínica puede resultar de la reactivación de focos latentes de una infección previa no tratada, o ser consecuencia de una nueva infección, especialmente en pacientes inmunosuprimidos,  como individuos con HIV sida.

La histoplasmosis es altamente endémica en el continente americano, aunque también se encuentra distribuida en África, India, Australia, China, el sudeste asiático y algunas regiones de Europa.

La carga global real de la histoplasmosis es desconocida, no solo porque su notificación no es obligatoria, sino también porque presenta síntomas clínicos y hallazgos radiológicos inespecíficos que pueden confundirse con tuberculosis. Sumado a esto, actualmente no se dispone de métodos de diagnóstico precisos, lo cual produce una subestimación de los casos reales. Pese a estas dificultades, se calcula una incidencia anual de entre 100.000-300.000 casos de HDP en pacientes HIV/sida en todo el mundo, de los cuales aproximadamente 80.000 mueren a causa de esta micosis. En relación a esto último, el Centro para el Control y Prevención de Enfermedades (CDC,por sus siglas en inglés) de Estados Unidos ha incluido la histoplasmosis diseminada como una de las infecciones oportunistas que definen el sida desde 1987.

Además de este grupo de individuos, en la última década, se ve un aumento marcado en la incidencia de la histoplasmosis en enfermos con otras patologías que requieren tratamiento con corticoides, antitumorales, trasplantados de órganos sólidos y muchos de pacientes con enfermedades autoinmunes. No obstante, no hay estudios serios que refieran el número de casos.

Las principales causas de esta alta tasa de mortalidad son, por un lado, la falta de un diagnóstico precoz y la instauración de un tratamiento antifúngico adecuado y, por otro, la no adherencia o falta de acceso al tratamiento antirretroviral (TARV), tal como sucede en nuestro país, donde más del 80% de los pacientes HIV/sida con HDP no recibe TARV y el 40% desconoce su condición serológica reactiva para HIV. En relación a ello, datos proporcionados por la literatura internacional demuestran que H. capsulatum es un “asesino olvidado” que está produciendo una devastación silenciosa en América Latina, sobre todo en los individuos inmunosuprimidos.

La gravedad de la infección y su presentación clínica depende en gran medida de la carga fúngica inhalada y del estado inmunológico del individuo. Con el desarrollo de la inmunidad adecuada, la afeccion pulmonar y extrapulmonar se resuelve en el 95% de los casos. La HDP se presenta en los individuos incapaces de desarrollar una respuesta inmune adecuada. Las complicaciones pueden derivar en problemas pulmonares grves, ulceraciones mucocutaneas, meningitis cronica, fibrosis mediastinal y la muerte.

El diagnóstico de la HDP constituye aún un desafío en muchos países de América Latina. El diagnóstico definitivo se establece mediante el aislamiento del microorganismo o por la identificación del hongo en muestras clínicas, aunque ambos procedimientos tienen una sensibilidad limitada (se detecta en pocos casos). Asimismo, los cultivos del hongo pueden demorar 3-4 semanas, y requieren de laboratorios con nivel 3 de bioseguridad. Las pruebas moleculares no han sido suficientemente validadas, sus costos son elevados, no se dispone de kits comerciales y su sensibilidad para la identificación de la HDP es baja. Mientras que la detección de anticuerpos por las técnicas actuales presenta baja sensibilidad en individuos inmunocomprometidos, los ensayos de detección de antígenos probaron ser una herramienta sensible y rápida para el diagnóstico de HDP.

Sin embargo, los pocos kits comerciales disponibles para la detección de antígeno urinario de Histoplasma poseen un elevado costo, por lo cual solo son realizados en pocos laboratorios del país y la región.

Realizamos dos sistemas de diagnóstico, basados en un nuevo biomarcador, una proteína recombinante fúngica, llamada HC100. Por un lado, desarrollamos un kit que permite su detección en orina y otro que permite su detección en sangre con mayor sensibilidad y especificidad que los comerciales.

Estamos validando los kits de diagnóstico con mayor cantidad de muestras de sangre y orina de individuos con histoplasmosis y otras patologías similares ya que es necesario poder diferenciarlas. Estamos en tratativas en realizar un estudio multicéntrico en nuestro pais.

El beneficio de usar este test nacional sería que todos los hospitales y centros de salud de nuestro país, puedan diagnosticar de manera rápida y económica la HDP. También se apunta a comercializar estos test fuera de nuestro país.

Los próximos pasos son la validación de las técnicas desarrolladas, lo que significa que tenga un desempeño similar en diferentes centros y escalar la producción de los reactivos. Actualmente estamos comenzando también a desarrollar kits para diagnosticar otras patologías fúngicas prevalentes en nuestro país.

Este desarrollo está dirigido por los investigadores:

• Dr. Alejandro David Nusblat: Instituto de Nanotecnología (UBA - CONICET)
• Dra. Maria Lujan Cuestas: Instituto de Investigaciones en Microbiologia y Parasitologia Medica (UBA - CONICET)

Del trabajo también participan Carolina Rodríguez Laboccetta, María Agustina Toscanini y Víctor Fernández Briceño, del IMPaM y de NANOBIOTEC, Agustín Videla Garrido, Katherine Hermida y Alejandro Etchecopaz del IMPaM; Gladys Posse, del Laboratorio de Micología del Hospital Nacional Profesor Alejandro Posadas; Ruth M. Valdez y Yone A. Chacón, del Laboratorio de Micología del Hospital Señor del Milagro de Salta